题目：七叶鬼灯檠成分的提取及生物学活性的研究

七叶鬼灯檠(Rodgersia aesculifolia Batalin)为虎耳草科(Saxifragaceae)鬼灯檠属多年生草本植物，在陕西、甘肃、宁夏、河南等省区均有分布。七叶鬼灯檠是我国民间常用草药，根状茎入药称索骨丹，性凉，味苦，具有清热解毒、凉血、止血和收敛等功效。本文初步研究了七叶鬼灯檠黄酮和多酚类化合物的微波辅助提取工艺，并对其抗氧化和抗菌的药理学活性进行了初步研究，为深入研究和开发七叶鬼灯檠提供资料。主要研究结果如下：
(1)七叶鬼灯檠总黄酮的微波辅助提取? 考察了提取时间、乙醇浓度、料液比和微波功率这几个因素对总黄酮提取率的影响，并设计正交试验优化七叶鬼灯檠总黄酮的提取工艺，结果显示，各因素对提取率的影响大小为：液料比>提取时间>提取功率>乙醇浓度。最佳总黄酮提取条件为功率600 W，料液比1:30，乙醇浓度30 %，提取时间8 min，在此条件下，七叶鬼灯檠总黄酮的得率为0.89 %。
(2)七叶鬼灯檠总多酚微波辅助提取 采用正交试验对七叶鬼灯檠总多酚的提取工艺进行优化。结果显示，各因素对提取率影响大小为：料液比>乙醇浓度>提取时间>提取功率。优化的工艺结果为功率600 W、料液比1:30、乙醇浓度50 %、提取时间6 min时七叶鬼灯檠总多酚提取率值最大，为8.61 %。
(3)七叶鬼灯檠不同提取物的体外抗氧化研究? 采用分光光度法检测了回流法得到的甲醇、乙酸乙酯、正丁醇、水和微波辅助最佳工艺提取物的总黄酮和多酚的含量，并且比较了每种提取物清除DPPH· 和抑制亚油酸氧化的能力。结果表明，DPPH·自由基清除体系中，七叶鬼灯檠提取物清除自由基能力大小依次为，七叶鬼灯檠微波辅助多酚工艺提取物>乙酸乙酯提取物>微波辅助黄酮工艺提取物>甲醇提取物>正丁醇提取物>水提物。微波多酚提取物对DPPH·的IC50值为0.0122±0.0016 mg/mL，小于BHT的0.0136±0.0011 mg/mL。在β-胡萝卜素/亚油酸体系中，微波多酚工艺提取物对β-胡萝卜素的漂白作用抑制最强，在反应进行180 min后抑制率为87.04 %。6种提取物的多酚含量与自由基清除能力呈正相关。微波辅助提取七叶鬼灯檠多酚工艺得到的提取物多酚含量最高，为5.05±0.06 %，乙酸乙酯提取物的黄酮含量最高，为4.56±0.13 %。
（4）七叶鬼灯檠抗菌活性的研究 采用牛津杯法和96孔板法测定七叶鬼灯檠甲醇提取物的抑菌活性及其MIC和MBC。实验结果表明七叶鬼灯檠的甲醇提取物对试验的9种菌都表现出不同程度的抑制作用，对大肠杆菌的抑菌活性较高，抑菌圈为16.34±0.13 mm，MIC值为1.56 mg/mL，MBC值为50 mg/mL。
将大肠杆菌用MHB培养基培养并加入七叶鬼灯檠甲醇提取物测定其对大肠杆菌生长的影响，同时测定了大肠杆菌碱性磷酸酶活性，采用扫描和透射电子显微镜观察提取物对大肠杆菌的形态结构的影响。结果显示，在测定时间内，加入七叶鬼灯檠甲醇提取物后，大肠杆菌的生长曲线有着明显的变化，碱性磷酸酶实验结果显示提取物导致体系中的碱性磷酸酶含量明显上升，说明其对细胞膜通透性有着明显的影响。扫描电子显微镜观察显示提取物对大肠杆菌的形态有明显影响，大肠杆菌菌体明显膨胀、表面不平整、折光性变差。透射电子显微镜观察显示提取物作用后，大肠杆菌的细胞壁受到破坏，细胞内含物大量流失，细胞内部结构变化明显。
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