题目：SMND-309对急性心肌缺血治疗作用及其机制研究

研究背景和目的：冠心病(coronary heart disease disease，CHD) 又称缺血性心脏病，是冠状动脉病变引起的心肌缺血缺氧或坏死。急性心肌缺血为冠心病的一种类型,具有死亡率高、发病率高、致残率高的特点，是威胁人类健康的三大死亡原因之一。其基本病因为冠状动脉粥样硬化，造成管腔严重狭窄和心肌供血不足，使侧支循环未充分建立。一旦血供进一步急剧减少或中断，使心肌严重而持久地急性缺血达1小时以上，即可发生心肌梗死。近年来，随着社会生活方式及饮食结构的改变，缺血性心脏病的发病率呈逐年增加的趋势，占心脏病死亡率的10%～20%。心血管病，脑血管病和肿瘤并列为威胁人类健康的“三大杀手”。因此，抗心肌缺血药物的研究受到了世界各国的重视。目前常用的传统抗心肌缺血药物通过增加冠脉流量，调整氧的供应，降低心肌耗氧量以利于改善氧的供求关系，通过改善心肌代谢，发挥对心肌缺血损伤的保护作用和治疗作用。由于心肌缺血复杂的致病原因和病理生理改变，上述传统药物均存在一定的不足之处。因此开发新型抗心肌缺血药物和探索抗心肌缺血机制仍是一项重要的研究课题。SMND-309是山东省天然药物研究中心以药用植物丹参中提取分离的丹酚酸B（Sal B）为母体，经过结构改造而研发的具有自主知识产权的新化合物，根据前期试验证明，其具有抗凋亡、抗氧化、改善心脏缺血区血流，缩小急性心肌梗塞的范围以及改善缺血再灌流引起的心肌损伤等多种药理作用，并在保肝、抗肿瘤、抑制血小板聚集，加强胶原溶解方面也有重要作用。本文通过建立动物模型，初步探讨研究SMND-309对急性心肌缺血的治疗作用及其可能的作用机制。
方法：采用结扎大鼠冠状动脉左前降支建立急性心肌缺血模型，手术造模后，大鼠随机分为6组：假手术组，模型组，SMND-309低剂量组（5mg/kg）、中剂量组（10mg/kg）、高剂量组（20mg/kg），Sal B组（10mg/kg），每组20只。手术造模后5min，通过尾静脉给药，正常对照组和模型组分别给予相同体积的生理盐水。造模前及其造模后6小时持续监测心电图，造模6小时后腹主动脉取血，离心取血清，测定乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase LDH)、肌酸激酶同工酶(Creatine kinase-MB CK-MB)活性、谷草转氨酶(Aspertate aminotransferase AST)、肌钙蛋白T(Cardiac troponin T cTnT)含量。取血完毕后取大鼠心脏，取心尖部心肌用4%的多聚甲醛固定，制作常规石蜡切片，苏木精-伊红(Haematoxylin–eosin HE)染色观察损伤程度，脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(Deoxynucleotidyl transferase biotin-dUTP nick end labelling TUNEL)染色来检测心肌细胞凋亡，免疫组化法检测细胞凋亡相关的蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关蛋白(Bax)的表达。取心尖上部心肌组织，制组织匀浆液测定丙二醛(Malondialdehyde MDA)的含量及超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase SOD)、过氧化氢酶（Catalase CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase GSH-Px)的活性，考察SMND-309对心肌缺血所致自由基损伤的影响。
实验结果：(1) SMND-309（10mg/kg和20mg/kg）能明显抑制急性心肌缺血大鼠心电S-T段的抬高(p<0.05，p<0.01)，提高急性心肌缺血大鼠存活率。(2) SMND-309（10mg/kg和20mg/kg）能明显降低急性心肌缺血大鼠血清酶LDH、CK-MB、AST活性及cTnT的含量(p<0.05，p<0.01)。(3) SMND-309（10mg/kg和20mg/kg）能明显减轻因心肌缺血引起的病理组织损伤，抑制心肌缺血细胞的凋亡(p<0.01)，明显抑制促凋亡蛋白Bax表达，同时促进抗凋亡蛋白Bcl-2表达(p<0.05，p<0.01)。(4) SMND-309（10mg/kg和20mg/kg）能显著降低心肌组织中MDA含量(p<0.01)，增加心肌组织中SOD、GSH-Px、CAT活性(p<0.05，p<0.01)。(5) 10mg/kg SMND-309组与10mg/kg Sal B组相比有更明显的药效(p<0.05，p<0.01)。
结论：SMND-309对大鼠急性心肌缺血具有一定的治疗作用。SMND-309对心肌保护作用的机制可能与其抗自由基损伤、保护细胞膜、抑制心肌细胞凋亡有关。