题目：模拟高原训练及恢复方法对大鼠肾脏影响的组织学研究

目的与方法：
探讨模拟高原训练及恢复方法对大鼠肾脏组织的影响及其可能机制。选取SD雄性健康大鼠，8周龄，32只，国家标准啮齿类动物饲料进行分笼喂养，自由饮食、饮水，动物房相对湿度为30％-60％，温度20℃-24℃，自然光照。常压低氧房浓度为12.5%-12.7%，其相对高度为4000m。
模拟高原训练：大鼠随机分为4组：即常氧对照组，常氧训练组，低氧对照组，低氧训练组。常压低氧浓度为12.7%，大鼠跑台坡度为10度，速度为20m/min。低氧对照组和低氧训练组大鼠全部实验均在低氧房中操作进行。第一周的周1-2大鼠跑台速度20m/min，时间为10min，间歇1d，周4-6跑台速度为20m/min，时间为15min，间歇1d；第二周的周1-2跑台速度为20m/min，时间为20min，间歇1d，周4-6跑台速度为20m/min，时间为25min，间歇1d；第三周的周1-2跑台速度为20m/min，时间为30min，间歇1d，周4-6跑台速度为20m/min，时间为40min，间歇1d；第四周的周1-2跑台速度为20m/min，时间为50min，间歇1d，周4-6跑台速度为20m/min，时间为60min，间歇1d。每周休息2d，训练5d。
间歇低氧运动后不同条件下恢复：将SD大鼠64只，随机分为8组，每组8只：即低氧对照组、运动即刻组、常氧恢复24h组、低氧恢复24h组、常氧恢复48h组、低氧恢复48h组、常氧恢复7d组、低氧恢复7d组。常氧恢复是指常氧环境下自由活动和自由饮食；低氧恢复是指在氧浓度为12.7%，相对高度为4000m的条件下自由活动和饮食。间歇运动大鼠均在低氧房内的动物跑台上进行一次性训练，低氧浓度为12.7%，相对海拔高度为4000m，运动方案为运动3min，间歇3min，共重复10次，跑台梯度为10度，跑台速度为20m/min。在第10次运动结束后进入恢复方案。
在末次跑台训练结束后次日，腹腔注射20％乌拉坦麻醉，冰浴下开腹摘取肾脏，0℃-4℃生理盐水涮洗，去其外层结缔组织膜后迅速放入中性甲醛液固定。HE、Masson、VG、高碘酸品红和醋酸氨银特殊染色，观察肾脏髓质区和皮质区组织结构变化，采用免疫组织化学实验技术观察、测试肾脏皮质区Bax、Bcl-2、p53、PCNA、HIF-1α、VEGF、nNOS、iNOS、eNOS、TNF-α、HSP70表达变化。采用Leica显微成像系统采集图像，Image-Pro Plus 5.1图像处理软件进行图像采集和平均光密度（MOD）分析。
研究结果：
1 模拟高原训练可促进肾组织p53和Bax的表达，不同程度抑制Bcl-2的表达，使Bax/Bcl-2比值升高，提示模拟高原训练促进肾脏细胞凋亡增加。
2 模拟高原训练显著促进iNOS的表达，不同程度抑制nNOS和eNOS的表达，提示模拟高原训练通过nNOS和eNOS的表达维持肾脏的生理功能，通过nNOS的表达，使组织产生过量的NO，促使细胞凋亡增加。
3 模拟高原训练可促进肾脏HSP70和TNF-α的表达，表明模拟高原训练可引起细胞凋亡的加剧，导致肾脏组织的损伤；模拟高原训练促进TNF-α的过量表达，表明模拟高原训练增加肾组织的炎症反应。
4 模拟高原训练可促进肾组织HIF-1α、VEGF和PCNA的表达，提示模拟高原训练可促进肾组织细胞的增殖和间质的增生，导致肾小球增生肥大；模拟高原训练可促进HIF-1α和VEGF的过量表达，使HIF-1α对Bax和VEGF等作用加强，促使肾脏组织细胞凋亡加剧、肾小球滤过膜通透性增加，可能是模拟高原训练后运动员尿成份发生异常的重要原因。
5 常氧恢复条件下肾脏组织Bax和p53的表达和Bax/Bcl-2比率较低氧条件下为低，低氧训练可上调Bax和p53的表达和Bax/Bcl-2比值；常氧恢复条件下Bcl-2的表达较低氧条件下为高，在恢复过程中Bax和p53的表达和Bax/Bcl-2趋于一致；低氧恢复条件下较常氧恢复条件下细胞凋亡显著增多；低氧恢复过程中低氧恢复48h凋亡最高；常氧恢复过程中常氧恢复24h凋亡最高。提示常氧恢复最佳时间在24h时后；低氧恢复最佳时间在48h时后；且常氧条件恢复优于低氧条件恢复。
6 低氧训练可下调nNOS和iNOS的表达，上调eNOS的表达，使cNOS/iNOS比率上升；低氧恢复条件下nNOS表达较常氧条件下为低，iNOS和eNOS表达较常氧条件下为高，而低氧恢复条件下cNOS/iNOS比率较常氧条件下为低。低氧恢复条件下较常氧恢复条件下NOS表达增加，通过过量NO促进细胞凋亡，且常氧恢复48h凋亡最高，因此提示常氧恢复优于低氧恢复，恢复最佳时间在48h后，与时间密切相关。
7 低氧训练可下调TNF-α的表达，上调HSP70的表达；在低氧和常氧恢复条件下，TNF-α和HSP70变化表现为先上升后下降；低氧恢复条件下TNF-α和HSP70表达较常氧条件下为高。低氧训练可能通过下调TNF-α、上调HSP70保护肾脏的组织细胞，使肾功能适应低氧训练的需要；常氧恢复24h时致炎作用最强，48h时损伤程度最高；低氧恢复条件下较常氧恢复条件下致炎和损伤作用最显著。提示常氧恢复优于低氧恢复，且恢复最佳时间在48h后，与时间密切相关。
8 低氧训练可下调PCNA和VEGF的表达，上调HIF-1α的表达；低氧恢复条件下VEGF和HIF-1α表达较常氧条件下为低，PCNA表达较常氧条件下为高。提示可能是由于常氧恢复过程中大量的自由基产生，进一步损伤肾组织所致；PCNA的过表达，可能与肾组织修复和肾脏间质增生显著增加有关。
结论：
模拟高原训练可通过低氧和训练双重刺激增加组织的炎症反应，诱导肾脏组织的损伤，同时通过促进肾组织细胞的增殖、间质的增生，导致肾小球增生肥大和肾小管、肾小球基底膜增厚，使肾脏组织的细胞凋亡加剧；间歇低氧训练可造成肾组织的损伤，在恢复过程中损伤程度先增加后降低，低氧恢复较常氧恢复过程中致炎、损伤和增生作用显著，肾脏组织凋亡程度增加，提示运动造成的损伤具有延迟性，常氧恢复优于低氧恢复，且损伤的恢复与时间密切相关。