题目：CagA阳性幽门螺杆菌培养滤液对食管癌细胞系EC-109增殖的影响

食管癌是一种常见的恶性肿瘤，中国是世界上食管癌发病率最高的国家之一，其发病率和病死率在十大恶性肿瘤中居于第二位，仅次于胃癌。几十年来，研究人员对食管癌高发区现场进行了大量的流行病学调查、人群普查以及实验研究，探讨食管癌的病因、发病机制，迄今为止确切的病因和发病机制尚未十分清楚，初步结果提示食管癌是一个多因素、多阶段、进行性的演进过程，可能和地理环境、饮食、微生物感染、吸烟、嗜酒、遗传等因素有关。近年来随着食管癌生物性病因研究的深入，幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，H. pylori）与食管癌发生之间的关系逐渐引起了一些学者的关注。
H. pylori 是定植在人胃粘膜上的革兰氏阴性微需氧致病菌，1983年由Warren和Marshall首先从慢性活动性胃炎患者胃粘膜活检标本中分离出来，此后不久即在国际消化病学界引起了巨大轰动，它的发现对消化病学、特别是胃、十二指肠病学的发展起了极大的推动作用。二十多年来经过大量的流行病学调查及实验研究，目前已经证实：H. pylori与人类的慢性胃炎、消化性溃疡密切相关，同时又是引起胃癌和胃黏膜相关淋巴瘤的危险因素，并且1994年已被WHO 宣布为与胃癌相关的I类致癌因子。食管与胃同属上消化道，国内外学者已发现食管癌患者的H. pylori感染率较正常人群高，并且已经在食管癌组织中检测到H. pylori感染，总之目前初步流行病学研究提示H. pylori感染可能与食管癌发生有一定关系，但H. pylori和食管癌发生之间确切的关系以及作用机制还不甚清楚。H. pylori菌株毒力因子的差异其感染后造成不同结局的重要因素。H. pylori有多种致病因子，其中特征性致病因子CagA、VacA是H. pylori致病机制研究的热点。本研究通过对食管癌标本切片进行Giemsa染色，并将H. pylori（CagA+）培养滤液和H. pylori（CagA-）培养滤液分别与食管鳞癌细胞系EC-109共培养，不同时间点后，观察细胞形态学变化，采用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖活性，同时用流式细胞术检测细胞周期变化，体外观察幽门螺杆菌培养滤液对食管癌细胞增殖和凋亡的影响，从而探讨幽门螺杆菌感染在人食管癌发生发展中的意义。
实验结果表明：食管癌标本中存在螺杆菌感染，不同浓度的H. pylori培养滤液作用EC-109细胞后，可见H. pylori（CagA+）组可使细胞出现空泡样变，且呈浓度相关性，而H. pylori（CagA-）组无明显变化。流式细胞术检测显示，培养滤液在较低浓度时EC-109促细胞增殖明显，而在较高浓度时出现细胞凋亡，与MTT法检测结果吻合。
结论：H. pylori CagA基因能够引起EC-109细胞增殖与凋亡间的不平衡，提示螺杆菌慢性感染可能也是食管癌发生的原因之一。