题目：金银花中绿原酸的微波辅助提取及高速逆流

金银花为忍冬科植物忍冬(Lonicera japonica Thunb.)的干燥花蕾或带初开的花，又名银花、金花、忍冬花、金藤花等，自古被誉为清热解毒的良药。它性甘寒气芳香，甘寒清热而不伤胃，芳香透达又可祛邪。金银花既能宣散风热，还善清解血毒，用于各种热性病，如身热、发疹、发斑、热毒疮痈、咽喉肿痛等证，均效果显著。现代药理研究表明，金银花具有抗病原微生物、抗炎、解热、保肝、免疫调节、抗生育、止血、降血脂、中枢兴奋等作用。其主要活性成分有黄酮类、有机酸、挥发油等。金银花中富含绿原酸，由于绿原酸对许多疾病都具有明显的预防和治疗作用，日益受到医学及药学界的重视，社会需求巨大。
中药有效成分研究的关键所在是如何将有效成分高效率地提取出来，本项研究工作以中药金银花为研究对象，探索了更有效的中药有效成分提取、分离和纯化的方法。
本研究的第一部分是采用响应曲面法对金银花中绿原酸的微波辅助提取工艺进行了优化，并对提取物的抗氧化能力进行分析。详细考察了提取溶剂、提取剂浓度、液料比、提取时间、微波功率等对提取效率的影响。在此基础上以提取液在327 nm的吸光度和自由基清除能力为响应值，对影响提取效率的三个主要因素采用响应曲面法行优化；同时，采用二苯代苦味酰基自由基(DPPH•)体系研究提取物的抗氧化能力。结果表明微波辅助提取金银花中绿原酸的最佳工艺条件为：以43%的甲醇溶液作提取剂、按液料比40 mL/g、在微波功率400 W下辐射提取8 min，该条件下绿原酸二次提取的提取率为7.62%，高于药典提取方法-超声提取法(6.18%)；金银花提取物对DPPH•的清除能力与其中绿原酸含量呈正相关，绿原酸在金银花提取物的抗氧化能力中起主要作用。
本研究的第二部分是采用高速逆流色谱(HSCCC)法对绿原酸进行分离纯化，其意义在于为中药有效成分的提取分离纯化提供新的途径，为中药金银花的物质基础研究和资源的深度开发提供有价值的参考依据和方法。探讨了HSCCC分离、纯化绿原酸的条件，发展了一种简捷实用的制备金银花有效成分绿原酸的新方法。将微波辅助提取得到的金银花提取液经过滤、浓缩,所得浸膏作为高速逆流色谱分离的样品。采用TBE-300A型高速逆流色谱仪，以正丁醇∶乙酸∶水=4:1:5为溶剂系统进行分离纯化，用下相作流动相，上相作固定相，流动相流速为2.0 mL/min，仪器转速为1000 rpm，温度为25 °C。在上述条件下从金银花粗提物中经过一步纯化，得到绿原酸的纯度为98.2%。
用微波辅助提取、高速逆流色谱法分离纯化金银花中的绿原酸，方法简单、有效，为绿原酸的分离纯化提供了一种新途径。