题目：脂筏蛋白的拆离与膜质相互作用的研究

脂筏是细胞膜双层结构中含有脂质和特异蛋白的微区结构，直径约为100nm。脂筏中的脂质主要包括胆固醇、鞘磷脂、神经节苷脂。脂筏蛋白质是存在于脂筏上的一类特殊的蛋白质，它包括小窝蛋白(caveolin)、浮舰蛋白(flotillin)等一些具有特殊结构和功能的蛋白质，并且脂筏蛋白质在葡萄糖转运中还具有信号传导的功能。脂筏上的蛋白分子的密度大约为。当脂筏中蛋白质的密度与周围脂质的密度相同时，每个脂筏平均能够携带20个蛋白分子。少量的脂筏蛋白通过跨膜的方式直接插入到细胞膜中，大部分蛋白质是通过酰化的脂肪酸锚定在细胞膜上。脂筏蛋白的主要功能包括调节信号转导、调节细胞内的胆固醇水平、调节G蛋白的偶联受体功能、细胞分泌等。脂筏蛋白与多种生理疾病之间存在着密切的联系，如糖尿病、肌营养不良症、心血管疾病等。因此研究脂筏蛋白的拆离以及膜质相互作用的体外模拟的有着一定的应用价值和重要意义。本文从两方面开展工作：
(1)脂筏蛋白的拆离及原子力显微镜观察的研究：非离子去污剂Triton X-100(TX)与红细胞膜中的脂质、蛋白质之间发生相互作用而形成微囊，然后通过一系列的高速离心、超速离心可以分离得到脂筏蛋白质。在脂筏蛋白的分离过程比较了Triton X-100的浓度、孵育液与膜溶液的体积比以及孵育时间对不同组分中脂筏蛋白质含量和膜总蛋白的平均含量的影响，研究发现在拆离过程中Triton X-100的浓度、孵育液与膜溶液的体积比以及孵育时间的最佳条件分别为1%、3:1、1.5 h。用原子力显微镜对蛋白质含量最高组分进行观察，结果显示其组分的直径范围为50~100 nm，主要成分为脂筏蛋白质。实验结果为迅速的分离脂筏蛋白提供了一定的参考依据。
(2)膜质相互作用的研究：用LB膜技术初步研究了非离子去污剂(Triton X-100)、阴离子去污剂(十二烷基硫酸钠(SDS))与脂筏中的脂质成分(磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、胆固醇)相互作用的机理。运用单分子层混合性方程、单分子层膜弹性系数公式较为详细的研究了去污剂与脂质的不同比例条件下，磷脂酰胆碱与胆固醇、磷脂酰乙醇胺与胆固醇二元混合系统在空气/水界面上的相态行为。实验结果表明：在二元混合系统的分子层膜中，去污剂比例的增大对膜层中所形成的聚集体数目、膜层表面的崩溃压大小以及膜层中微区结构的相态过程的持续时间有明显的影响。根据对单分子层膜在不同的去污剂比例条件下膜的过量单分子面积、单位面积内物质的量、膜的弹性系数等参数的计算结果分析膜层的生理特性的变化。