题目：三叶木通的组织化学及有效成分积累规律研究

三叶木通（Akebia trifoliata(Thunb.) Koidz.）为木通科木通属落叶木质藤本，在我国多个省份都有分布。2000年以后，关木通由于其致肾毒性作用而被停用，三叶木通作为木通的正品之一，逐渐被人们所关注。药理研究证明，三叶木通中的有效成分主要为三萜皂苷类物质，在利尿、抗菌、抗癌等方面有广泛的开发应用价值。
本文运用组织化学定位法，研究了三叶木通皂苷类成分在各个营养器官(根、茎、叶)中的存在的部位，以高效液相色谱法为分析手段，通过对陕西镇安的野生和栽培三叶木通样本进行有效成分含量与生态因素、季节、年龄、表观形态等因素的比对，旨在阐明三叶木通有效成分产生、储存和积累的规律，为野生抚育、合理采收、制定植物药材GAP和提高药材的产量和质量做参考，同时也有利于三叶木通药用资源的合理开发和保护。
主要结果：
1.三叶木通的各个营养器官均存在皂苷类成分。在叶中，皂苷类成分主要存在于叶肉的栅栏组织和海绵组织；在茎中，主要存在于韧皮部、髓和髓射线中；在根中，主要存在于韧皮部和髓射线中。通过对不同营养器官的不同发育阶段及不同部位材料进行的组织化学定位研究，初步认为，三叶木通中的皂苷类成分产生于植株的同化组织，包括叶和幼茎的绿色部分。叶片作为主要产生部位，显色最为明显，其他诸如叶柄、嫩茎尖、绿色幼茎均能观察到表皮和大量的皮层细胞显色。成熟茎有了薄薄的周皮后，皮层显色细胞的量和色度均降低，到了老茎皮层已无显色细胞，这一切均说明，随着茎的发育成熟，可进行同化作用的细胞逐渐减少，因而，显色的细胞数目和色度降低，到了老茎，皮层已无显色细胞。植物有机物运输主要靠韧皮部，三叶木通也不例外，无论叶片、叶柄、或是各个不同发育阶段的茎和根，凡是有维管束的地方，均能观察到韧皮部有显色细胞，一般来说老的根、茎中韧皮部的显色细胞数目多、色度强，整个韧皮部会看到一个显色的矩形区域。髓射线也是一个重要的显色部位，三叶木通的根和茎都拥有很宽阔的髓射线，从幼嫩茎尖到老茎、老根都能看到此区域强烈显色。此外，茎的髓部也是一个明显的显色部位，特别是成熟茎，即刚产生周皮的茎，其髓部显色非常明显，可以观察到髓部细胞内的紫色网络状、液滴状物质，而老茎的髓部着色不强，只能隐约看到液滴状物质。
2. 影响三叶木通有效成分的主要因素是年龄，特别是有效成分中的齐墩果酸积累。实验所采样品的年龄从7-18岁不等，在这个年龄段可以看出，有效成分积累会出现负相关。常春藤皂苷元的积累受生态因素影响更明显，它的积累和坡度呈现显著负相关，猜测它的积累受水分条件影响大，因为受地表径流的影响，坡度大的地方土壤含水量少。郁闭度和有效成分含量也呈负相关。结合前面组织化学研究的结论，可以解释为，郁闭度大的样本，同化作用弱，产生的皂苷类成分少，总体来说，生态因素的影响作用是受年龄制约的，只有在一定年龄段，生态因素才会和有效成分含量呈现显著相关性，大于某个年龄段后，年龄的负相关作用就将生态因素的影响掩盖了，分析不出显著相关性。从季节变化来看，果实脱落期的样品有效成分含量大于花期和幼果期的，因此有的文献中记载的三叶木通为秋、冬采集是正确的。叶片作为一种新的药源有很大开发价值，实验结果显示，新生枝条上的叶片有效成分含量和多年生枝条上的叶片有显著差异性，作为药材，其等级和质量要远优于多年生枝条生叶片。