题目：粉葛根中葛根素和大豆苷元的微波提取及HPLC-荧光法测定研究

葛根是豆科葛属植物野葛或粉葛的块根，含有丰富的异黄酮和淀粉，是国家卫生部批准的药食两用植物。葛根异黄酮具有防治和改善心脑血管疾病、抗肿瘤、抗氧化、护肝、调节内分泌系统等多种药理作用。葛根总异黄酮含量高达7.6%，有葛根素、大豆苷、大豆苷元等30 多种异黄酮成分，其中葛根素是本属特有成分和主要有效成分，约占总异黄酮含量的50%。葛根素的含量与总异黄酮含量常被作为评价葛根质量的主要指标。
我国葛属植物资源丰富，但一直存在着种植与加工规模小、提取工艺与分析检测的技术和设备相对落后、产品附加值不高等突出问题，制约了葛根工业产业化的良性发展。本论文中以此为切入点，研究内容涉及葛根异黄酮的提取与分离条件的优化、新检测方法的建立等，为开发与综合利用葛根资源和建立葛根产品质量评价指标提供理论依据以及为葛根异黄酮药代动力学研究提供新的方法。
本论文包括四个部分。
1. 绪论
从葛根的概述、分布与种类、化学成分、应用以及药理作用五个方面对葛根的研究概况进行了综述；简要介绍了黄酮类化合物的定义、结构、分类和性质、葛根异黄酮化合物的提取以及分离检测方法等内容；最后对固相萃取技术及应用进行了讨论。
2. 响应曲面法优化葛根异黄酮的微波提取条件
研究了葛根异黄酮的微波提取（MAE）条件。采用响应曲面分析法（RSM）对影响总黄酮提取率影响比较明显的三个提取条件：甲醇体积, 微波功率，提取时间的最佳水平范围进行研究, 通过对二次多项回归方程求解得到最优提取参数：甲醇体积30.4 mL，微波功率560.9 W，提取时间11.3 min。所选用的二次多项模型具有高度的显著性。
3.  HPLC-荧光法同时测定粉葛根中的葛根素和大豆苷元。
建立了高效液相色谱 (HPLC)-荧光法同时测定粉葛根中葛根素和大豆苷元含量的方法。本方法对液相分析条件进行了优化，并对方法的线性关系、精密度、准确度等性能指标进行了评价。结果表明，测定葛根素和大豆苷元的线性范围分别为5.0-1000 mg/L和1.0-200 mg/L，平均回收率在93.8%-109.6%之间，RSD < 7.4%。和药典方法比较，本方法简便、准确、快速并且有更高的提取率。此法可用于药材中葛根素和大豆苷元的测定，也可用于含这两种异黄酮的药材的质量评价。
4. SPE-HPLC-荧光法在线测定中成药在血清中葛根素和大豆苷元的含量
建立了SPE-HPLC-荧光法自动化在线同时测定人血清中葛根素和大豆苷元的新方法。该方法不需要烦琐的样品前处理过程，血清中的杂质不干扰葛根素、大豆苷元的测定；实验中测定人血清中葛根素、大豆苷元的检出限 (S/N> 3) 分别为0.09 和 0.06 ng，定量限 (S/N> 10) 分别为0.3 和0.2 ng。葛根素质量在0.17-8.5 μg 呈良好的线性关系，大豆苷元浓度在0.04 – 2 μg呈良好的线性关系，人血清中葛根素、大豆苷元质量的标准曲线线性关系良好(R2 > 0.999)；在线性范围内，生物样品中的准确度均在90% - 110%，日间和日内的精密度RSD% < 7.5%。本实验分析方法特异性、灵敏度高，精密度、准确度均满足药代动力学研究的方法学要求。为药代动力学研究奠定了基础。