题目：蒲公英糖蛋白的分离纯化、结构及生物活性研究

蒲公英(Taraxacum mongolicum)既是传统的营养保健野菜，又是常用的中药材，富含多种营养元素及保健功能因子，有很大的开发价值。目前对于蒲公英活性成分的研究仅限于小分子物质，而对于活性多糖及糖蛋白类物质的研究报道较少。为了进一步开发利用蒲公英资源，本课题选取蒲公英为材料，采用现代分离分析技术对蒲公英糖蛋白组分进行了分离、纯化，并对纯化组分进行了组成及结构测定，采用现代功能评价方法对粗提物的生物活性进行了初步研究，试验主要结论如下：1. 采用热水浸提法提取蒲公英糖蛋白，正交试验得出最佳提取条件为：料液比1:25、浸提温度80℃、浸提时间2h、NaCl浓度0.1mol/L，糖蛋白得率为4.49%。2. 采用超声辅助法提取蒲公英糖蛋白，正交试验得出最佳提取条件为：超声功率250W、超声处理20min、NaCl浓度0.05mol/L、料液比为1:20，糖蛋白得率为6.87%。3. 蒲公英糖蛋白精制品(TMGP)经DEAE-52离子交换纤维素柱层析和SephadexG-100凝胶柱层析分离出TMGP-1′、TMGP-2′、TMGP-3′三种组分，其纯度鉴定采用琼脂糖凝胶电泳法，结果表明三种组分均为均一组分。4. 采用氨基酸自动分析仪测定蒲公英多糖及糖蛋白均一性组分中氨基酸组成，结果表明：TMGP-1′未检测出氨基酸，为纯的多糖，其余两种组分都含有18种已测定的氨基酸，在氨基酸种类上无差异，天冬氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸苯丙氨酸含量均较高。5. 气相色谱、紫外光谱、红外光谱分析结果表明，TMGP-1′主要由葡萄糖和果糖组成，分子量899.5kD，比旋光度+53.2°；TMGP-2′中的糖链主要由葡萄糖、半乳糖组成，含少量的鼠李糖和一未知组分组成，分子量467.2kD，比旋光度+87.9°； TMGP-3′中的糖链主要由葡萄糖、半乳糖组成，含少量的果糖、甘露糖、木糖和阿拉伯糖，分子量373.4kD，比旋光度+123.7°。6. 体外抗氧化活性表明，蒲公英糖蛋白(TMGP)不仅具有很强的还原能力，而且对超氧阴离子自由基、羟基自由基均有较好的清除能力，且在一定范围内对二者的清除作用呈现良好的量效关系。7. 小鼠体内抗氧化活性表明，蒲公英糖蛋白可以显著提高小鼠血清、肝组织、脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的活性，而显著降低这些组织中丙二醛（MDA）的含量。结果表明蒲公英糖蛋白具有抗氧化性。