题目：首乌藤黄酮的提取分离及生物活性研究

首乌藤，为卫生部公布的药食同源中药品种之一，是何首乌的藤茎或带叶藤茎。对它的研究主要集中在种植、鉴别及临床应用方面，而对其化学成分尤其是黄酮类化合物的研究较少。本试验以市售经生药学鉴定的首乌藤为原料，对黄酮的提取工艺、分离纯化及生物活性进行了研究，结果如下：
(1)通过对比不同溶剂对于首乌藤黄酮的提取效果，确定乙醇为提取溶剂；
(2)有机溶剂提取试验结果表明，各因素对首乌藤总黄酮得率的影响依次为：提取时间>乙醇浓度>提取温度>料液比。最佳工艺条件为：提取时间2.5h，乙醇浓度50%，提取温度70℃，料液比1:20。在此最佳工艺条件下提取2次，首乌藤总黄酮的得率是8.93%；
(3)超声辅助提取试验结果表明，各因素对首乌藤总黄酮得率的影响依次为：超声功率>乙醇浓度>提取温度>提取时间。最佳工艺条件为：超声功率200W，乙醇浓度60%，提取温度50℃，提取时间40min。在此最佳工艺条件下提取2次，首乌藤总黄酮的得率是12.79%；超声波辅助法提取与常规法提取相比，总黄酮得率提高了43.23%；
(4)超声辅助提取后所得到首乌藤黄酮粗品，经三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取后，可得到不同的溶剂萃取物，其中正丁醇萃取物最多，其次为乙酸乙酯萃取物；
(5)通过对10种树脂的静态吸附试验，确定了大孔树脂LS300B对首乌藤黄酮正丁醇萃取物具有较好的吸附和解吸性能，是一种理想的吸附剂，适宜于对首乌藤黄酮的分离；
(6)对首乌藤黄酮正丁醇萃取物分别通过LS300B大孔吸附树脂柱色谱、聚酰胺柱色谱及硅胶柱色谱进行了纯化分离，得到了3个黄酮类组分，并通过聚酰胺薄层色谱及颜色反应进行鉴定，证明其30%乙醇洗脱组可能是双氢黄酮类物质；其50%乙醇洗脱组分及70%乙醇洗脱组分经聚酰胺柱色谱及硅胶柱色谱分离，经薄层色谱鉴定仍是混合物，需要进一步分离纯化；
(7)通过非油体系体外活性试验得出，超声提取得到的首乌藤黄酮及相应的萃取物，在同浓度条件下与BHT比较，都具有较为明显的体外抗氧化活性。其中，还原能力的大小顺序为：水相残留物﹥超声提取物﹥正丁醇萃取物﹥BHT﹥乙酸乙酯萃取物；对•OH自由基、O2－•自由基及DPPH•自由基的清除作用最强的是首乌藤黄酮水相残留物，且对•OH自由基的清除能力高于BHT；
(8)比较空白对照组，低、中、高剂量饲喂组小鼠的体重和各器官的重量，经过饲喂黄酮正丁醇萃取物的小鼠的各器官重量无显著的变化；
(9)比较空白对照组，低、中、高剂量饲喂组可以看出，首乌藤黄酮正丁醇萃取物可以有效地降低血清、肝组织、脑组织中MDA的含量，特别是中、高剂量组达到了极显著水平；血清、肝组织、脑组织中的GSH-Px的活力和SOD活力都比空白对照组有提高，中、高剂量组几乎全部与空白组相比有极显著差异。中、高组血清、肝组织中CAT活力与空白组相比有显著差异。证明首乌藤黄酮是一种良好的抗氧化功能性化合物。
研究表明，黄酮类化合物在首乌藤中不仅有较高的含量，而且有较高的生物活性，因此首乌藤具有良好的药用、食用价值，是一种极具开发前景的植物资源。