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问题:

题目:白术多糖的提纯、结构分析、硫酸化修饰及其生物活性研究

关键词:白术多糖,结构分析,硫酸酯化,抗氧化活性,抑菌性

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白术系药食同源物,为菊科植物白术(Atractylodes macrocephala Koidz)的干燥根茎。含有多种生物活性成分,具有增强免疫、降血糖、调血脂、降血压等作用,因此有重要的研究与开发价值。本文以白术为原料,对白术多糖的提取、分离纯化、理化性质、化学修饰、结构分析、生物活性等方面进行了系统的研究,得到如下结论:
1.白术多糖热水浸提法的最佳工艺条件为:料液比1︰30、提取温度80℃、提取时间180min、提取1次。白术多糖的实际得率可达8.55%,总糖含量和糖醛酸含量分别为53.5%,29.11%。
2. 对热水浸提法所得白术粗多糖(AM)的水洗组分命名为WAM。WAM的分子量为3263Da,由鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和木糖组成,其比例为:0.47︰1.36︰2.43︰0.85。 WAM主链是以鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和木糖构成,支链由鼠李糖、葡萄糖、半乳糖构成,无支链或主链的末端残基。WAM的相邻糖残基的连接方式以1→2、1→4、1→6等键型为主,少数以1→3键型链接,糖苷键以β-构型为主,而且表现出吡喃糖的特征吸收。
3.硫酸酯化白术多糖(SWAM)的最优工艺条件为:吡啶和氯磺酸比例3︰1,反应温度80℃,反应时间3h, 0.1g的WAM取20mL酯化试剂。根据影响白术多糖硫酸酯的因素,制备了取代度分别为0.35、0.86、1.64的白术多糖硫酸酯SWAM-1、SWAM-2、SWAM-3。
4.五种多糖(AM、WAM、SWAM-1、SWAM-2、SWAM-3)均具有一定的总还原能力和清除羟自由基、DPPH·自由基、脂质过氧化的能力,但对超氧自由基无清除作用。硫酸化后多糖的抗氧化能力没有增强。在同等浓度条件下,三种不同取代度的硫酸化多糖(SWAM-1、SWAM-2、SWAM-3)对DPPH·自由基、脂质过氧化的清除能力大小依次为: SWAM-2>SWAM-1>SWAM-3,而对羟自由基的清除能力区别不明显。这些证明了化学基团的引入可能会改变多糖的生物活性。
5. 五种多糖(AM、WAM、SWAM-1、SWAM-2、SWAM-3)对所抑制的菌种种类具有选择性。在试验菌种范围内,AM对大肠杆菌和青霉有抑制作用,其最小抑菌浓度分别为0.0625mg/mL、1.0mg/mL。WAM对枯草芽孢杆菌有抑制作用,其最小抑菌浓度为2.0mg/mL。SWAM-1对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌有抑制作用,其最小抑菌浓度分别为4.0mg/mL、1.0mg/mL。SWAM-2对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌有抑制作用,其最小抑菌浓度均为1.0mg/mL。SWAM-3对四种供试菌种均无抑制作用。

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