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问题:

题目:山楂多酚的提取、分析及抗氧化活性研究

关键词:山楂,多酚,微波辅助提取,高效液相色谱,抗氧化活性

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山楂为蔷薇科山楂属植物山里红(Crategus pinnatifida Bge. var. major N.E.Br.)或山楂(Crategus pinnatifida Bge.)的干燥成熟果实,是一种重要的药食两用植物资源。山楂在我国种植栽培面积广阔,产量可观,其主要功能为消食健胃、行气散癖。药理研究表明,山楂具有多种重要的生理活性,主要体现在预防和治疗心血管疾病方面。关于山楂化学成分已有研究报道,其所含的黄酮、前花青素、酚酸以及三萜酸等化学成分与其生理活性息息相关。但鲜见有关山楂多酚的研究报道,本文从山楂多酚的提取,化学成分分析、抗氧化活性三方面进行了系统研究。
本论文包括综述和研究报告两部分内容。
第一部分:综述
    从下面三方面进行了综述:
    1.山楂研究概况
    从山楂植物研究概述、山楂化学成分研究现状、山楂药理活性与临床应用三方面对山楂的研究概况进行综述。
    2.多酚研究概况
    包括多酚概述、多酚提取方法研究现状、多酚分析方法研究进展以及多酚的药理活性及应用四方面的内容。
    3.抗氧化作用研究进展
    包括抗氧化物质概述、氧化-抗氧化平衡与人类健康、体内抗氧化系统、评价体外抗氧化能力的自由基体系,以及天然抗氧化物质及其抗氧化作用等几部分内容。
第二部分:研究报告
    分为三个部分:山楂多酚的微波辅助提取;山楂多酚提取物的含量测定和成分鉴定;山楂多酚提取物的体外抗氧化活性研究。
    1、山楂多酚的微波辅助提取
    采用微波辅助提取法提取山楂多酚物质,对提取条件进行了优化。通过单因素实验考察了浸泡时间、料液比、乙醇浓度、微波功率、辐射时间和提取次数在微波辅助提取中对山楂多酚提取率的影响。在此基础上,采用响应表面优化法对乙醇浓度、微波功率和辐射时间这三个重要因素进行了详细考察。实验结果表明,山楂多酚的最佳提取条件为:浸泡时间90 min,料液比1:20,乙醇浓度83%,微波功率440 W,辐射时间13 min,提取次数为3次。在此最佳条件下,山楂多酚提取率达到23.5%。
2、山楂多酚提取物的含量测定和成分鉴定
    建立了同时测定山楂中绿原酸、表儿茶素和芦丁3种酚类物质的反相高效液相色谱分析方法,并考察了这三种酚类物质在山楂干果果肉、干果果核和鲜果果肉中的含量。结果表明,表儿茶素在山楂鲜果果肉中含量最高,达到1.661±0.024 mg/g;绿原酸和芦丁在山楂干果果肉中含量最高,分别达到0.550±0.002 mg/g和0.498±0.002 mg/g。本分析方法样品处理简单;具有良好的重现性和线性关系,相关性系数均达到0.999;绿原酸、表儿茶素和芦丁的回收率分别为91.8%~110.9%,94.6%~107.9%和94.2%~108.8%;检出限分别为0.14,0.37和0.68 μg/ml (S/N =3)。
对山楂多酚提取物中另外两种相对含量较高的组分进行LC-MS联用分析鉴定,经与文献对照,初步推断为原花青素B2和原花青素C1。
3、山楂多酚提取物的体外抗氧化活性研究
    实验通过测定山楂多酚对DPPH·自由基、·OH自由基、超氧阴离子自由基的清除能力、抗脂质过氧化能力以及还原能力,探讨其体外抗氧化活性。结果显示:山楂多酚的浓度在0.2 mg/mL时,对DPPH·的清除率达到87.8%;当浓度达到0.5 mg/mL时,对·OH清除率达到了90.8%,且清除活性强于Vc;对超氧阴离子的清除活性IC50值为4.0 mg/mL;对脂质过氧化的抑制率IC50值为0.134 mg/mL,当多酚提取物浓度达到0.2 mg/mL时,抑制率达72% ;山楂多酚有较强的还原能力,当浓度达到0.5 mg/mL时,其还原能力几乎接近于阳性对照BHT。这些实验表明山楂多酚具有较强的体外抗氧化活性。

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