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问题:

题目:磁场结合顺铂对肿瘤细胞K562杀伤效应机制的初步研究

关键词:SMF,顺铂,DNA损伤, HPLC,单细胞凝胶电泳

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目的:研究静磁场(static magnetic fields,SMF)联合顺铂对K562细胞杀伤作用的机制;应用高效液相色谱(HPLC)检测磁场处理前后K562细胞对顺铂的摄取量,比较细胞对顺铂的摄取量与细胞活力间的关系;通过彗星电泳检测,分析静磁场联合顺铂致人外周血淋巴细胞DNA损伤情况,比较其与K562细胞的异同。
方法:
1. MTT法检测磁场联合不同浓度顺铂处理K562细胞(人红白血病细胞)12h内细胞活性变化趋势;MTT法检测12h内磁场联合顺铂处理K562细胞活性随时间变化的趋势。
2.HPLC法检测了12h内K562细胞对顺铂的摄取;彗星电泳检测了12h内SMF联合顺铂对K562细胞DNA的损伤;并用彗星电泳检测了SMF联合顺铂处理人静息淋巴细胞12h细胞DNA损伤情况。
结果:
(1)MTT检测不同浓度顺铂结合磁场处理后K562细胞活力变化,实验结果显示,顺铂浓度在6μg/mL以下,无论是否与SMF共同作用,K562细胞的活性均无明显影响;终浓度为8μg/mL的顺铂对细胞活性没有影响,但与SMF联合则可导致细胞活性显著降低(P<0.05),表现出明显的协同效应;
(2)顺铂结合SMF处理K562细胞时,12h内细胞活性呈持续性下降。细胞活性明显低于对照的临界时间点为6h;
(3)SMF联合顺铂处理K562细胞0~12h,HPLC检测表明细胞对顺铂的摄取呈现持续上升趋势,至10h后因细胞完整性被破坏,细胞摄取的顺铂量不再增加;
(4)SMF联合顺铂处理K562细胞0~12h,彗星电泳检测表明细胞DNA损伤呈现累积增加的趋势,SMF处理不能提高累积的趋势,但可提高相同处理条件时细胞的DNA损伤。
(5)SMF联合顺铂处理人静息淋巴细胞12h,与相同条件处理的K562相比,淋巴细胞DNA损伤水平较低,显示淋巴细胞对抗肿瘤药物以及SMF有更好的耐受性。
结论:
(1)实验表明SMF结合顺铂处理K562细胞,SMF可增强细胞对顺铂的摄取,SMF作用下顺铂在细胞内累积量的增多是顺铂与其产生协同杀伤作用的机制之一。
(2)SMF结合顺铂处理K562细胞12h,SMF增强了顺铂对K562细胞DNA的损伤,损伤程度与细胞内顺铂的含量正相关。
(3)SMF结合顺铂处理人淋巴细胞和K562细胞12h,均可产生DNA损伤,但K562细胞的DNA损伤比淋巴细胞更严重;两种细胞DNA损伤程度的差异涉及细胞染色质的包装和结构差别,淋巴细胞有更好的耐受性。

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