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问题:

题目:一种微生物提取物的制备及其解酒作用的研究

关键词:醋酸杆菌提取物,解酒

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酒的文化历史悠久,其消费群体在逐步增多,酒精中毒患者逐渐增多,大量饮酒,特别是烈性酒,不仅对人体的消化、神经、循环等系统产生严重的损伤,也是危害家庭和社会稳定的不良因素,因酒精引起的直接与间接的死亡率已成为严重的公共卫生问题和社会问题。目前市场的解酒药物以保肝药物为主,防醉效果较差,所以开发解酒防醉效果良好的解酒产品具有十分广阔的市场前景。
食醋的生产分为3个过程:淀粉水解成糖,糖发酵成酒精,酒精氧化成醋酸。这3个发酵过程都是在不同的酶作用下进行的。食醋生产的第三个阶段是在醋酸菌的作用下发生的物质变化,具体过程为:乙醇在乙醇脱氢酶的催化下,氧化成乙醛,通过吸水形成水合乙醛,再由乙醛脱氢酶氧化成乙酸,这个物质转化过程与酒精在人体中发生的代谢过程基本一致。说明醋酸菌中存在能将乙醇氧化成乙酸的两种酶,所以从醋酸杆菌中提取出的两种酶应该能有效催化酒精在体内的代谢,加快酒精在人体内的氧化和排泄速度。
目前国内外在生产上常用的醋酸菌有:奥尔兰醋杆菌(A. orleanense)、许氏醋杆菌(A. schutzenbachii)、恶臭醋杆菌(A. rancens)等。而恶臭醋酸杆菌是我国酿醋常用菌株之一,所以本实验选用常用菌株1.41型醋酸菌。
本文从理论和实验两方面探讨了1.41型醋酸杆菌提取物的解酒作用,为醋酸杆菌酶提取物作为解酒药提供科学可信的理论依据,选取小鼠进行动物实验,采用给动物酒精灌胃的方法,建立急性酒精肝损伤的动物模型,主要进行了如下工作:
1、大量培养醋酸杆菌,获得足够酶粗提物,测定粗提物中乙醇脱氢酶与乙醛脱氢酶两种酶的最适pH、最适温度和酶的保护剂及在不同pH与不同保护剂的储存下酶提取物的活性变化,研究发现醋酸杆菌提取物中的乙醇脱氢酶的最适pH为11,最适温度为30℃,而乙醛脱氢酶的最适pH为11,最适温度为50℃,而这两种酶在偏碱性的缓冲液中保存活性最稳定;
2、建立小鼠醉酒模型,从醉酒率、醉酒时间、醒酒时间、死亡率等一系列指标观察醋酸杆菌提取物的解酒效果,结果显示该解酒药对于小鼠的醉酒率、翻正反射消失时间及其醒酒有明显影响,差异显著(P﹤0.05),除此之外,醉酒率相对于阳性对照组差异显著(P﹤0.05),说明醋酸杆菌提取物相对于阳性对照海王金樽更有效,有很好的开发价值;
3、建立小鼠急性酒精型肝损伤模型,采用气相色谱法测定小鼠血液中酒精浓度、检验醋酸杆菌提取物是否具有解酒保肝的作用,结果表明,醋酸杆菌提取物能有效降低血液中酒精浓度,相对于模型组差异显著(P﹤0.05),通过对灌酒前后肝脏中的AST、ALT测定显示该解酒药对小鼠的肝脏具有保护作用,且保护作用明显。
 

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