题目：绞股蓝黄酮的指纹图谱及调控积累研究

绞股蓝Gynostemma pentaphyllum(Thunb.) Makino系葫芦科Cucurbitaceae 绞股蓝属Gynostemma多年生草质藤本植物,全草入药。
本实验选取绞股蓝为材料，对超声法提取绞股蓝中黄酮类化合物进行了优化；采用反相高效液相色谱法建立了陕西省内7份绞股蓝样品的黄酮指纹图谱及陕西、湖北、江西、安徽四省共14份绞股蓝样品的黄酮HPLC指纹图谱；对向绞股蓝愈伤组织中添加茉莉酸甲酯后黄酮化合物含量及与代谢相关的生理态势的变化进行了初步研究。
1．以提取时间、提取溶剂及提取溶剂浓度为优化对象，研究了绞股蓝中芦丁的超声波提取工艺。在一定范围内，芦丁提取率随着乙醇浓度的增大而增大，但是当乙醇浓度为90%时，由于蛋白质等生物大分子的溶解性降低，凝聚堵塞组织的微孔，芦丁从组织细胞内向周围提取溶剂扩散的传质阻力增大，因而绞股蓝中芦丁的提取率明显降低。实验结果表明：提取的溶剂以及提取溶剂的浓度是影响绞股蓝芦丁提取含量的最主要因素，超声时间影响较小。
2.以绞股蓝为实验对象，探索了高效液相色谱条件，详细考察了绞股蓝全草的色谱分离条件，包括供试品溶液制备、参照物的选择、色谱条件（色谱柱的选择、流动相的选择、检测波长的选择）等影响因素。以绞股蓝黄酮成分为定位特征峰建立了绞股蓝的高效液相分析方法。该方法精密度、重复性、稳定性良好。
3.建立了不同产地绞股蓝材料的高效液相指纹图谱，为其品质鉴定和质量控制提供了方法和依据。该方法一次进样即能得到众多的色谱峰，分离分析效率高，且各色谱峰保留时间相当稳定，所建立的指纹图谱具有稳定性和可控性。
4. 研究了绞股蓝愈伤组织中添加茉莉酸甲酯后苯丙氨酸解氨酶、保护酶活性以及总黄酮含量的变化及其相关性。使用低浓度外源MJ能够提高苯丙烷代谢活性，提高绞股蓝愈伤组织中黄酮含量，诱导POD、SOD、CAT、PAL酶活性增强。其中50μmol/LMJ处理组与对照组有显著差异（P<0.05）。说明MJ处理能够增强绞股蓝愈伤组织的酶促防御系统的抗氧化能力，保持活性氧代谢的平衡。高浓度的MJ（100μmol/L、150μmol/L）处理对绞股蓝愈伤组织保护酶活性有抑制作用。