题目：药用石韦的孢子扫描电镜观察及黄酮化合物的组织化学定位和测定

石韦为水龙骨科（Polypodiaceae），石韦属(Pyrrosia Mirbel)多种植物，广布于东北、华北、华中、西北和西南各省区。其地上部分可作药用，味苦、甘，性微寒，具有利尿通淋、清肺止血的功效。2005年《中华人民共和国药典》将同属3种植物石韦[Pyrrosia lingua (Thunb.) Fatwell]庐山石韦[Pyrrosia sheareri(Bak.) Ching]和有柄石韦[Pyrrosia petiolosa (Christ) Ching]的干燥叶作为石韦药材使用，同属多种植物也在全国不同地区应用。
为了使各种药源石韦易于区别，提供药材的亚显微结构资料，更有利于区分外观形态较相似的不同种石韦，对石韦的药材鉴定及质量控制是非常必要的。对中药石韦中的成分分析方法进行研究，并测定石韦中不同种、不同部位成分的含量，可为石韦药材的质量控制及合理使用提供化学依据。我们对5种药用石韦进行了较系统的研究，得到了以下结果：
（1）利用扫描电镜对所采毡毛石韦Pyrrosia drakeana (Franch.) Ching、有柄石韦Pyrrosia petiolosa (Christ) Ching、华北石韦Pyrrosia davidii (Bak.) Ching、石韦Pyrrosia lingua (Thunb.) Fatwell孢子的表面饰纹观察，为以后的药材鉴定提供了可靠的亚显微结构资料。
（2）组织化学染色结果显示：药用石韦的黄酮类化合物基本分布于石韦药材叶的表皮、叶肉细胞以及星状毛；叶柄的皮层厚壁组织、髓细胞、维管束鞘及韧皮部；在根状茎中主要分布在表皮、髓细胞及韧皮部。在实际应用中，星状毛往往被弃而不用，这无形中损失了黄酮化合物提取的有效部位。
（3）采用正交实验设计法，筛选优化提取参数，探究石韦总黄酮的提取工艺，并利用最佳提取工艺提取5种不同石韦材料总黄酮，采用分光光度法进行测定后加以比较。结果表明，5种药用石韦的叶总黄酮含量明显高于根状茎的黄酮含量。总黄酮含量由高到低依次为：毡毛石韦117.508mg/g，石韦药材103.449mg/g，有柄石韦97.576mg/g，石韦68.994mg/g，华北石韦53.548mg/g。不同种石韦总黄酮含量存在显著差别，提示不同种石韦可能具有不同的药用功效。所以把总黄酮作为石韦中药质量控制的指标成分之一，对不同种石韦分别制定评价标准，区别对待，是很有必要的。
（4）利用薄层色谱及薄层扫描对5种石韦材料乙酸乙酯提取部位进行检测。结果显示，不同药用石韦所含的化学成分种类虽较相似，但也有一些差别。5种石韦样品中，地下部分均没有检测到槲皮素及山奈酚。只有毡毛石韦的地上部分含有槲皮素。另外，除华北石韦不含山奈酚外，其余材料均检测到了山奈酚。5种所测样品的叶中可能均有齐墩果酸的分布。